球王会官方NatureMethods：我国学者开发了新的干与单分子定位显微镜

　　2019年9月23日讯 /生物谷BIOON /--各种根据图画的中心方位估量(称为质心拟合)办法，如二维高斯拟合办法，在单分子定位显微镜(SMLM)中已被广泛用于准确确认每个荧光团的方位。但是，如何将单分子横向定位精度进步到分子标准( 2 nm)来完成高通量纳米结构成像仍然是一个应战。

　　我国科学院生物物理研讨所的徐涛教授和纪伟教授在《Nature Methods》网站上宣布了一项研讨，他们开发了一种新的干与单分子定位显微镜技能，使用了快速调制的结构光照，称为重复光学选择性曝光(Repetitive Optical Selective Exposure，ROSE)。

　　ROSE使用六种不同方向和相位干与条纹来激起荧光分子。荧光分子的强度与干与条纹的相位密切相关。荧光分子的定位是经过干与条纹的多个激起形式的强度，供给了大约两倍的定位精度的进步。该技能将单分子定位显微镜(SMLM)的分辩率进步到小于3 nm (~1 nm定位精度)。

　　为了验证ROSE的功能，研讨人员首要规划了5-、10-和20-nm点对点间隔的DNA折纸结构的三种不同网格。传统的质心拟合和ROSE都能够在相同的光子预算下求解20nm结构。ROSE也能够明晰地分辩出10nm的间隔，这是质心拟合无法处理的。

　　研讨人员标明， ROSE能够以3纳米的分辩率处理25 * 25μm2的大视场中5 nm的结构，这意味着ROSE有才能推进进步SMLM分子规划的分辩才能。

　　此外，使用ROSE剖析细胞纳米结构，研讨人员发现，ROSE在处理单个微管长丝的中空结构、小网格蛋白包被凹坑(CCPs)和肌动蛋白长丝的细胞纳米结构方面具有优势。傅里叶环相关(FRC)剖析标明，与质心拟合办法比较，ROSE进步了两倍的终究分辩率。

　　经过引进沿轴向的附加激起形式，ROSE能够扩展到三维纳米标准成像。该办法有望在分子水平上拓宽SMLM在生物大分子动力学剖析和结构研讨中的使用。（生物谷